HISAT2 インストール
HISAT2のサイトにインストールが簡単なバイナリー版が準備してあるので、ダウンロードして使います。使用したのは、「Linux x86_64 binary」版です。
HISAT2
HISAT2 インストール手順
# ホームディレクトリに移動 $ cd # hisat2 ダウンロード $ wget ftp://ftp.ccb.jhu.edu/pub/infphilo/hisat2/downloads/hisat2-2.1.0-Linux_x86_64.zip . # hisat2 解凍 $ unzip hisat2-2.1.0-Linux_x86_64.zip # 展開チェック $ ls hisat2-2.1.0 # パスを通す(例ではホームディレクトリを活用) $ sudo ln -s ~/hisat2-2.1.0/hisat2 /usr/local/bin/ # 起動チェック $ hisat2 -h HISAT2 version 2.1.0 by Daehwan Kim (infphilo@gmail.com, www.ccb.jhu.edu/people/infphilo) Usage: hisat2 [options]* -x {-1 -2 | -U | --sra-acc } [-S ]
HISAT2 マッピング
hisat2をインストールすると、インストールフォルダにexampleデータが準備されています(今回の例では、~/hisat2-2.1.0/example/)。それらのデータを使って動作確認してみます。exampleの使い方は、HISAT2 MANUALの、「Getting started with HISAT2」に詳しく書かれています。
HISAT2 マッピング シングルエンド unpaired
シングルエンドのマッピング例として、example/read_1.faだけを指定して実行します。入力は、indexとread(read_1.faのみ)。出力をsam形式のファイルで指定しました。実行後、Alignment summaryが表示され、sam形式のファイルが出力されます。
指定方法 シングルエンド unpaired
$ hisat2 -f -x インデックス -U read.fa -S 出力sam
example 動作確認
# hisat2 インストールで格納されるexampleフォルダへ移動 $ cd hisat2-2.1.0/example $ hisat2 -f -x index/22_20-21M_snp -U reads/reads_1.fa -S eg1.sam # Alignment summary 1000 reads; of these: 1000 (100.00%) were unpaired; of these: ... 省略 ... 100.00% overall alignment rate # 出力データの確認 $ ls eg1.sam
オプション
・-x:hisat2 index 指定
・-f:FASTA 形式の通知
・-U:シングルエンドの指定
・-S:sam形式の出力指定
indexもexample/indexで準備してあるものを使用しました。hisat2では、主な生物のindexが準備してあるので、ダウンロードして使うことができます。
$ ls index/ 22_20-21M_snp.1.ht2 22_20-21M_snp.3.ht2 22_20-21M_snp.5.ht2 22_20-21M_snp.7.ht2 22_20-21M_snp.2.ht2 22_20-21M_snp.4.ht2 22_20-21M_snp.6.ht2 22_20-21M_snp.8.ht2
HISAT2 マッピング ペアエンド paired-end
ペアエンドのマッピング例として、example/read_1.fa, read_2.faの両方を指定して実行します。入力は、indexとペアエンドの各read。出力をsam形式のファイルで指定しました。実行後、Alignment summaryが表示され、sam形式のファイルが出力されます。
指定方法 ペアエンド paired-end
$ hisat2 -f -x インデックス -1 read1.fa -2 read2.fa -S 出力sam
example 動作確認
# hisat2 インストールで格納されるexampleフォルダへ移動 $ cd hisat2-2.1.0/example $ hisat2 -f -x index/22_20-21M_snp -1 reads/reads_1.fa -2 reads/reads_2.fa -S eg2.sam # Alignment summary 1000 reads; of these: 1000 (100.00%) were paired; of these: ... 省略 ... 100.00% overall alignment rate $ ls # 出力データの確認 eg2.sam
オプション
・-x:hisat2 index 指定
・-f:FASTA 形式の通知
・-1:ペアエンドの指定
・-2:ペアエンドの指定
・-S:sam形式の出力指定
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